ਸ਼ੁਕ੍ਰਾਣੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨਰ ਅਤੇ ਮਾਦਾ ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਕੌਡਾ ਐਪੀਡੀਡੀਮਿਸ ਤੋਂ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਸਾਰੇ ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ 14-ਘੰਟੇ/10-ਘੰਟੇ ਹਲਕੇ-ਹਨੇਰੇ ਚੱਕਰ (20:00 ਤੋਂ 06:00 ਤੱਕ ਹਨੇਰਾ) ਦੇ ਤਹਿਤ ਬਣਾਈ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਸਾਰੇ ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਬੇਤਰਤੀਬੇ ਤਿੰਨ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਆਈ. ਸੀ. ਐੱਸ. ਆਈ. ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸੰਤਾਨ ਉੱਤੇ ਪੀ. ਐੱਮ. 2.5 ਦੇ ਅੰਤਰ-ਪੀਡ਼੍ਹੀ ਅਤੇ ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।