नर और मादा चूहों के कौडा एपिडिडाइमिस से शुक्राणु के नमूने एकत्र किए गए थे। सभी चूहों को 14-घंटे/10-घंटे प्रकाश-अंधेरा चक्र (20:00 से 06:00 तक गहरा) के तहत बनाए रखा गया था, और सभी चूहों को यादृच्छिक रूप से तीन समूहों में विभाजित किया गया था। आईसीएसआई तकनीकों का उपयोग संतानों पर पीएम 2.5 के अंतर-पीढ़ीगत और ट्रांसजेनेरेशनल प्रभावों की जांच करने के लिए किया गया था।